【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明！

商品介紹：

測定意義
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要?dú)涫荏w，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧，在合成ATP的同時(shí)，形成大量的ROS，同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過氧化狀態(tài)。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外，NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH，NADH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

特點(diǎn)：
       1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案，1小時(shí)即可完成
       2、靈敏度高，操作便捷
       3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑
 

常見樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議 500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液） ，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲 3s，間隔10s，重復(fù)30 次）8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g組織，
加入 1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

腦型肌酸激酶(CKB)天然蛋白    Native Creatine Kinase, Brain (CKB)     

糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)天然蛋白     Native Glycated Hemoglobin A1c (HbA1c)     

血紅蛋白(HB)天然蛋白     Native Hemoglobin (HB)      

免疫球蛋白G1(IgG1)天然蛋白     Native Immunoglobulin G1 (IgG1)     

免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白     Native Immunoglobulin G (IgG)     

免疫球蛋白G1(IgG1)天然蛋白     Native Immunoglobulin G1 (IgG1)     

ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)天然蛋白     Native Ischemia Modified Albumin (IMA)     

ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)天然蛋白     Native Ischemia Modified Albumin (IMA)     

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白     Native Carbonic Anhydrase II (CA2)     

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白     Native Carbonic Anhydrase II (CA2)     

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1(CEACAM1)天然蛋白     Native Carcinoembryonic Antigen Related Cell Adhesion Molecule 1 (CEACAM1)     

肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白     Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)     

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白     Native Myoglobin (MYO)     

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白     Native Transferrin Receptor (TFR)     

107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白    Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)    

10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)重組蛋白    Recombinant Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)    

188kDa核孔蛋白(NUP188)重組蛋白    Recombinant Nucleoporin 188kDa (NUP188)    

1號(hào)染色體開放閱讀框85(C1orf85)重組蛋白    Recombinant Chromosome 1 Open Reading Frame 85 (C1orf85)    

35kDa核孔蛋白(NUP35)重組蛋白    Recombinant Nucleoporin 35kDa (NUP35)    

ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)重組蛋白    Recombinant Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)    

70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)重組蛋白    Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)    

Adropin蛋白(AD)重組蛋白    Recombinant Adropin (AD)    

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G1(ABCG1)重組蛋白    Recombinant ATP Binding Cassette Transporter G1 (ABCG1)    

beta Amyloid 31-35    β淀粉樣肽（31-35)/Aβ 31-35 抗體    

beta-Amyloid 1-40(CT)    β淀粉樣肽 1-40（C端）抗體    

Beta arrestin 2    β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體    

Anthrax    炭疽桿菌抗體    

ACD    腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白抗體    

Angiotensin II type 1A receptor    血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體    

ABI1    ABI1/SSH3BP1蛋白抗體    

Acetyl-Histone H1.4 (K53)    乙?；M蛋白H1b抗體    

phospho-Androgen Receptor (Ser578)    磷酸化雄激素受體抗體    

APE1    多功能DNA修復(fù)酶抗體    

AAK1    AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體    

AQP1    水通道蛋白1抗體    

AATK    AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酶抗體    

H輔酶ⅠNAD測試劑盒微量法ABCB5    ATP結(jié)合蛋白家族5抗體    

APNG    N-甲基嘌呤DNA糖基化酶    

AU5 tag    AU5 tag標(biāo)簽抗體    

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。